Рубрики
Анализ крови

Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном

Анализ крови реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном

Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном

Реакция микропреципитации с кардиолипиновым Аг на сифилис в норме отрицательная.

МР позволяет выявить АТ к кардиолипиновому Аг бледной спирохеты. МР при изолированном применении служит не диагностическим, а отборочным тестом, в связи с чем на основании её позитивности диагноз сифилиса не устанавливают, а пациенту проводят диагностические тесты (РСК, ИФА). С помощью МР обследуют лиц, подлежащих периодическим медицинским осмотрам на венерические заболевания, больных соматическими заболеваниями и др.

Существует несколько вариантов микрореакций — VDRL (Venereal Disease Research Laboratory), TRUST (Toluidine Red Unheated Serum Test), RST (Reagin Screen Test), RPR (repid plasma reagin) и др. RPR-тест (МР плазмы с кардиолипиновым Аг) бывает положительной в 78% случаев при первичном, в 97% — при вторичном сифилисе. VDRL-тест (МР инактиви-рованной сыворотки с кардиолипиновым Аг) положителен при первичном сифилисе в 59-87% случаев, при вторичном — в 100%, при позднем латентном — в 79-91%, при третичном — в 37-94% [Henry J. B., 1996]. МР обычно отрицательны в первые 7-10 дней после появления твёрдого шанкра.

В случае положительных результатов VDRL, RPR-тестов можно определить титр реагиновых АТ. Высокий титр (более 1:16) обычно указывает на активный процесс, низкий титр (менее 1:8) — на ложноположительный результат исследования (в 90% случаев), а также возможен при позднем или позднем латентном сифилисе.

Исследование титра АТ в динамике используют для оценки эффективности лечения. Снижение титра указывает на положительный ответ на проводимое лечение. Адекватное лечение первичного или вторичного сифилиса должно сопровождаться 4-кратным снижением титра АТ к 4-му месяцу и 8-кратным — к 8-му месяцу. Лечение раннего латентного сифилиса обычно приводит к концу года к отрицательной или слабоположительной реакции. Подъём титра в 4 раза указывает на рецидив, реинфекцию или неэффективность терапии и приводит к необходимости повторного курса лечения. При вторичном, позднем или латентном сифилисе низкие титры могут сохраняться у 50% пациентов дольше 2 лет, несмотря на снижение титра. Это не указывает на неэффективное лечение или реинфицирование, так как эти пациенты остаются серологически положительными, даже если повторить курс лечения. Следует учитывать, что изменения титров при позднем или латентном сифилисе часто непредсказуемы, оценка эффективности лечения по ним затруднительна.

Чтобы отдифференцировать врождённый сифилис от пассивного носи-тельства материнской инфекции, новорождённым необходимо провести серию исследований с определением титра АТ: подъём титра в течение 6 мес после рождения свидетельствует о врождённом сифилисе, в то время как при пассивном носительстве АТ исчезают к 3-му месяцу.

При оценке результатов VDRL и RPR-тестов у детей грудного возраста с врождённым сифилисом необходимо помнить о феномене прозоны. Сущность этого феномена состоит в том, что для агглютинации Аг и АТ в этих реакциях необходимо, чтобы Аг и АТ находились в крови в соответствующем количестве. Когда количество АТ значительно превышает количество Аг, агглютинации не происходит. У некоторых детей грудного возраста с врождённым сифилисом содержание АТ в сыворотке настолько велико, что в неразбавленной сыворотке не происходит агглютинации АТ и нетрепо-немных Аг, используемых для диагностики сифилиса (тесты VDRL и RPR нереактивны). Поэтому у детей, обследуемых с целью диагностики врождённого сифилиса, возможен феномен прозоны. Во избежание ложноотри-цательных результатов в таких случаях необходимо проводить исследования с разведением сыворотки и без него.

Микрореакция VDRL может быть негативной при раннем, позднем латентном и позднем сифилисе приблизительно в 25% случаев, а также у 1% больных вторичным сифилисом. В таких случаях необходимо использовать метод ИФА.

Ложноположительная реакция микропреципитации возможна при ревматических заболеваниях (например, СКВ, ревматоидный артрит, склеродермия), инфекциях (мононуклеоз, малярия, микоплазменная пневмония, активный туберкулёз, скарлатина, бруцеллёз, лептоспироз, корь, эпидемический паротит, венерическая лимфогранулёма, ветряная оспа, трипаносомоз, проказа, хламидиоз), беременности (редко), в старческом возрасте (около 10% людей в возрасте старше 70 лет могут иметь ложноположитель-ную МР), при хроническом лимфоцитарном тиреоидите, гемобластозах, приёме некоторых гипотензивных средств, наследственной или индивидуальной особенности.

RPR-тест МР плазмы с кардиолипиновым Аг бывает положительной в 78 случаев при первичном, в 97 при вторичном сифилисе.

Medn. ru

08.12.2017 0:54:23

2017-12-08 00:54:23

Источники:

Https://medn. ru/statyi/reakciyamikropr. html

Кардиолипиновая проба что это за анализ » /> » /> .keyword { color: red; } Анализ крови реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном

Кардиолипиновая проба что это за анализ

Кардиолипиновая проба что это за анализ

Существуют три класса антител к кардиолипину, которые можно определить в крови: IgG, IgM и/или IgA. Наиболее часто используют тестирование IgG и IgM.

Антитела igg и igm к кардиолипину изучаются для диагностики антифосфолипидного синдрома, анализ которых показан в случаях риска выкидышей и спонтанных абортов у беременных, рецидивирующих венозных или артериальных тромбозах и ряда других заболеваний.

При каких заболеваниях рекомендуется выполнять анализ

    Риск преждевременных родов или спонтанных абортов. Артериальный или венозный тромбоз. Риск тромбообразования у больных с заболеваниями соединительных тканей. Необъяснимые тромбоцитопении. Заболевания гепатитом С, малярией, сифилисом, ВИЧ-инфекцией. Подозрение на алкогольный цирроз печени. Лейкемия.

Методология анализа антител к кардиолипину

Анализ антител к кардиолипину производится путем проведения иммуноферментного анализа (ИФА). Такое исследование основано на использовании антитела к выявляемому антигену, который соединен со специфической меткой (субстратом ферментативной реакции). У пациента берется биологический материал, помещается в лунки (на 20-30 мин.), далее в эти лунки добавляют антитела. Полученная смесь оставляется на определенное время (0,5-5 часов) для того, чтобы антитела нашли и связались с антигеном.

Процедура проведения скрининга

Процедура проведения скрининга (взятие пробы на антитела) выполняется в следующей последовательности:

    Взятие крови на пробу перед проведением венепункции. Проведение венепункции для забора крови в пробирку с разделительным гелем. Место венепункции придавливается ватным тампоном до остановки кровотечения.

Данная процедура должна осуществляться натощак, можно пить воду. За день ограничить употребление жирной и жареной пищи, алкоголя.

Профессионально проведенные анализы позволяют своевременно выявить заболевание и разработать план эффективного лечения.

Очень важно проводить анализ такого типа при патологии беременности. Если у беременной будет обнаружены антитела к кардиолипину, то в 90-95% могут возникнуть выкидыши, гипоксия или гибель плода, различные осложнения.

Кардиолипин (антитела IgG, IgM)

Кардиолипин (дифосфатидилглицерол) — фосфолипид, который присутствует в плазме крови в составе липопротеинов и входит в состав внутренней мембраны митохондрий. Антитела к кардиолипину (АКА) относятся к группе антифосфолипидных антител, обладают протромбогенным потенциалом и являются одним из лабораторных критериев диагноза АФС.

Формируются при целом ряде заболеваний: аутоиммунных заболеваниях, инфекциях (сифилис, лептоспироз, болезнь Лайма, микоплазмоз, туберкулез, вирусных инфекциях — ВИЧ, ВЭБ, парвовирусе В 19, гепатитах), злокачественных новообразованиях. Кроме того, синтез данных антител может быть спровоцирован приемом целого ряда лекарственных препаратов: β-блокаторами, гидралазином, α-интерфероном, кокаином, фенотиазином, фенитоином, хлорпромазином, хинином и другими. В данных клинических случаях АКА не приводят к тромботическому эффекту и транзиторны. Главное значение синтеза данных антител рассматривается при АФС, при котором практически в 80–90% случаев выявляются данные антифосфолипидные антитела (высокая диагностическая чувствительность), вызывают тромботические осложнения и выявляются постоянно, — поэтому при первичном скрининге рекомендовано определение данных антител. Однако необходимо учитывать, что антикардиолипиновые антитела обладают недостаточной специфичностью — они могут быть положительными у здоровых людей (по разным литературным данным, у 2–4%), при других заболеваниях, поэтому при обследовании пациентов необходимо определение тестов с более высокой специфичностью (волчаночного антикоагулянта и антител к β-2-гликопротеиду I). Выявление АКА класса IgM чаще наблюдается в острый период тромботических эпизодов, аутоиммунных и инфекционных заболеваний, при приеме препаратов.

Нетрепонемные тесты на сифилис

7. Область применения метода

РВ можно ставить в количественном варианте (титром называют последнее разведение, которое дает резкоположительный или положительный результат). Возможно постановка РВ с ликвором. РВ с кардиолипиновым антигеном может использоваться для скрининга.

8. Источники и причины ошибок при постановке, ложноположительные и ложноотрицательные результаты

РВ может быть положительной у лиц, никогда не болевших и не болеющих сифилисом. Например, ложноположительные (неспецифические) результаты РВ наблюдаются у многих больных лепрой, иногда при малярии, аутоиммунных заболеваниях (системная красная волчанка), распадающихся злокачественных новообразованиях, обширных инфарктах миокарда и других заболеваниях, а порой и у совершенно здоровых людей. Кратковременная неспецифическая позитивация РВ наблюдается у ряда женщин непосредственно перед родами и сразу после них, у наркоманов, после наркоза, приема алкоголя и т. п.

Ложноположительная РВ, как правило, выражена слабо, т. е. выпадает чаще с низким титром реагинов (1:5 — 1:20), или положительная (3+) и слабоположительная (2+). В целом при массовых серологических обследованиях частота ложноположительных результатов РВ составляет около 0,1 — 0,15%.

9. Особенности, преимущества и недостатки

Реакция Вассермана сыграла важную роль в становлении современной сифилидологии, так как:

    способствовала установлению диагноза и длительности заражения при манифестных, скрытых формах инфекции, висцеральном сифилисе, обосновывала необходимость назначения превентивного лечения; способствовала установлению эффективности терапии (по снижению титров реакции).

Реакции Ваесермана присущи существенные недостатки, ограничивающие ее применение:

1) недостаточна я чувствительность.

РВ отрицательная в начале первичной стадии, бывает негативной и у 1/3 больных третичным активным сифилисом с поражениями кожи, слизистых оболочек, костей, внутренних органов, центральной нервной системы, поздним врожденным сифилисом, ос обенно если они в прошлом подвергались лечению антибиотиками;

2) недостаточная специфичность.

Основные недостатки реакции Вассермана:

    сравнительно низкая чувствительность наличие ложноположительных результатов сложность постановки необходимость предварительной подготовки исследуемых сывороток (прогревание) необходимость тщательной подготовки исходных реагентов (титрование комплемента и гемолитической сыворотки, отмывка эритроцитов барана, разведение кардиолипинового антигена). реагенты и саму реакцию сложно стандартизировать постановка реакции в целом весьма трудозатратна

Кроме того, этот метод — длительно выполняемый, сравнительно дорогостоящий, субъективно интерпретируемый, часто дающий ложноотрицательные и ложноположительные результаты — не подлежит стандартизации, автоматизации и протоколированию результатов, а следовательно, не подлежит внешнему контролю.

Таким образом, отдавая должное исторической роли реакции, предложенной Wassermann, Neisser и Bruck, следует признать, что в настоящее время реакция Вассермана в её исходном исполнении — морально устаревший метод. После открытия реакции Вассермана были разработаны другие нетрепонемные тесты

По вышеуказанным причинам, в США и западноевропейских странах вместо реакции Вассермана применяются другие стандартные нетрепонемные тесты.

10. Модификации метода

Чтобы до известной степени преодолеть недостаточную чувствительность РВ, применялась её постановка на холоде (реакция Колмера), которая оказалась более чувствительной, чем в классической постановке. В 1926 г. Kolmer предложил наиболее ценную модификацию РСК, при которой связывание антигена с антителом проходит при комнатной температуре, соединение комплекса антиген — антитело с комплементом — при 6—8 °C, период после добавки гемолитической системы — при 38 °С.

Данная модификация РВ основана на феномене двухфазного связывания комплемента. Особенностью реакции Колмера является двухфазность температурных режимов (первая фаза — при температуре 18-20 °С в течение 30 мин, вторая — в холодильнике при температуре +4 – +6 °С в течение16-20 ч), при которых протекает связывание комплемента.

Метод обладает более выраженной чувствительностью, чем РВ с кардиолипиновым антигеном, т. к. реакция Колмера улавливает реагины в тех сыворотках, где в силу их небольшой концентрации РВ, поставленная по обычной методике, дает отрицательный результат.

Ранее эта реакция рекомендовалась для использования в диагностических целях при первичном сифилисе и скрыто протекающей сифилитической инфекции. Однако, по мнению большинства сифилидологов, реакция Колмера и РВ с кардиолипиновым антигеном при своей высокой чувствительности уступает в своей специфичности трепонемным модификациям РВ.

Количественная методика Боаса

В 1909 году Boas рекомендовал PCK с уменьшающимися объемами исследуемой сыворотки крови. В 1942 г. Kolmer предложил методику PCK с уменьшенным объемом ингредиентов (1/5). Эти методы сохранили ценность до настоящего времени.

В случае получения резко положительных результатов реакций Вассермана и Колмера их ставят с уменьшающимися дозами испытуемой сыворотки для определения титра реагинов. Количественное определение реагинов помогает отдифференцировать ранний и поздний скрытый сифилис, а также позволяет легче оценивать эффективность противосифилитической терапии: снижение титра реагинов свидетельствует об эффективности лечения.

Советские исследования по модификациям РСК

Важным направлением в развитии серодиагностики сифилиса была разработка простых и экономичных модификаций РСК. Советскими специалистами были разработаны неиспользуемые в настоящее время модификации, которые можно было ставить в слабооборудованных лабораториях, в экспедициях и подобных же условиях с ограничением по обеспечению лабораторным оборудованием и реагентами.

Также применялась одновременная постановка РВ с другими серологическими реакциями. В СССР реакция Вассермана применялась в комплексе с двумя осадочными реакциями (Кана и Закса — Витебского). Иммунологическая сущность этих реакций ничем не отличается от РВ, но для них необходимо готовить более концентрированные антигены, которые при взаимодействии с реагинами сыворотки дают видимый глазом осадок, оцениваемый качественно (4+, 3+ и т. д.).

В 70-е годы в СССР использовались регламентированые приказом Минздрава от 1974 года модификации РСК, одной из которых была реакция Григорьева — Раппопорта, осноснованная на применении в РСК естественного комплемента исследуемой сыворотки. Гемолизин — кроличья гемолитическая сыворотка с разными титрами. Реакция Вайнштейна — Резниковой основывалась на использовании естественного комплемента и гемолизина испытуемой сыворотки.

Цитохолевая реакция Закс-Витебского. Реакция Кана

Данные реакции основаны на феномене образования мелкодисперсного хлопьевидного осадка (флоккулята или преципитата) при смешивании определенных липоидных антигенов с сывороткой или плазмой крови больных сифилисом. Осадочные реакции (реакция Кана и цитохолевая) также основаны на образовании комплекса антиген — реагины испытуемой сыворотки, проявляющегося макрофлоккулятом.

Реакция Закса-Витебского (Sachs H., Witebsky E., 1928) — метод серодиагностики сифилиса, основанный на реакции преципитации, развивающейся в сыворотке крови больного при добавлении концентрированного цитохолевого антигена. Таким образом, это ускоренная реакция преципитации для серодиагностики сифилиса. Синоним — цитохолевая реакция.

Реакция Кана (Kahn R. L., 1922) — серологическая реакция преципитации для диагностики сифилиса, в настоящее время не применяется. При смешивании ликвора или сыворотки крови больного сифилисом с холестеринизированным антигеном выпадают хлопья. Антиген приготовлялся из сердечной мышцы быка путем последовательной эфирной и спиртовой экстракции и прибавлением холестерина к экстракту.

Реакции Кана и цитохолевая Закса—Витебского много проще по технике выполнения по сравнению с РВ. Для их постановки используются более концентрированные антигены, которые содержат большое количество холестерина. При их постановке выпадает осадок, хорошо видимый невооруженным глазом (иногда для оценки результатов пользуются лупой или агглютининоскопом).

Осадочные реакции регистрируют по 4-балльной системе: выпадение крупных хлопьев — 4+; средних — 3+; мелких — 2+ и отсутствие взвешенных частиц — отрицательная.

Обе эти реакции долгое время применялись в комплексе стандартных реакций для диагностики сифилиса, фактически являлась одним из первых вариантов практического применения реакций преципитации. Реакции проводили в пробирках, при этом не требовалось присутствия комплемента; в качестве антигена применяли липидные антигены, приготовленные из сырья животного происхождения.

Согласно многочисленным данным, реакция Кана дает совпадающие результаты с реакцией Вассермана в 93-96% наблюдений (ее неспецифические результаты регистрируются в 1,6%), а реакция Закса-Витебского — в 95-99% (ее неспецифические результаты регистрируются в 1,3% наблюдений).

В настоящее время, эти реакции не используются для диагностики сифилиса..

Реакция преципитации (РП) — это выпадение в осадок специфического иммунного комплекса, состоящего из растворимого антигена и специфического антитела в присутствии электролита. Образующееся в результате реакции мутное кольцо или осадок называется преципитат. Разновидностью преципитации является реакция флоккуляции (по Рамону, Ramon)— появление опалесценции или хлопьевидной массы (иммунопреципитации) при при смешении токсина с соответствующей иммунной сывороткой (реакции токсин — антитоксин или анатоксин — антитоксин). Хлопьевидный осадок называется флоккулят. Реакция флоккуляции представляет собой преципитацию, при которой растворы антигенов и антител смешивают в пробирке.

Вскоре после открытия комплементсвязывающего теста было установлено, что реакцию между вассермановским антигеном и сифилитическими сыворотками можно обнаружить по преципитации (флокуляции). Феномен образования преципитата при смешивании липоидного антигена с сывороткой или плазмой крови больного сифилисом был описан Michaelis в 1907 году. Это стало основой для разработки множества технических модификаций флокуляционного кардиолипинового теста на сифилис. Благодаря простоте, возможности стандартизации, дешевизне и скорости выполнения, они вытеснили из клинической практики классическую реакцию Вассермана и в настоящее время широко используются для скрининга сифилисной инфекции.

Осадочные тесты — цитохолевую реакцию Закс-Витебского и реакцию Кана — в течение длительного времени применяли в составе комплекса стандартных реакций (КСР) для диагностики сифилиса. Исследование проводили в пробирках, в качестве антигена использовали оригинальные прописи, включающие в себя кардиолипин, холестерин и лецитин в различных пропорциях, при этом не требовалось дополнительного введения комплемента. Образующийся комплекс микрофлоккулята был виден невооруженным глазом.

В последующие годы при модификации с целью повышения качества кардиолипин-холестерол-лецитинового антигенного комплекса были разработаны и предложены различные коммерческие варианты методики выполнения флоккуляционных тестов (VDRL, USR, RPR, TRUST), отличающиеся как по техническим параметрам проведения реакции, так и по применяемому антигену (соотношению композитных частей).

Флоккуляционные реакции на основе кардиолипинового антигена относят к нетрепонемным реакциям по причине того, что антиген получают не из возбудителя сифилиса (бледной трепонемы), а при технологическом соединении высокоочищенных биологических реагентов животного происхождения (холестерина, кардиолипина и лецитина). Соотношение ингредиентов антигена в настоящее время стандартизировано.

В настоящее время основным нетрепонемным методом серодиагностики сифилиса в России и многих странах СНГ является реакция микропреципитации (РМП). РМП ставится или с инактивированной сывороткой крови, или с плазмой в день взятия крови из пальца.

РМП представляет собой реакцию преципитации на стекле. Как и в реакции Вассермана, используется кардиолипиновый антиген. Реакцию проводят с плазмой крови или инактивированной сывороткой крови. Для постановки реакции кровь берут из пальца (получают плазму) или из вены (получают сыворотку). К плазме или сыворотке крови исследуемого добавляется эмульсия кардиолипинового антигена. Для приготовления эмульсии используется хлорид натрия и кардиолипиновый антиген, который изготавливается серийно.

Принцип РМП заключается в том, что при добавлении эмульсии кардиолипинового антигена к плазме или сыворотке крови больного сифилисом образуются хлопья преципитата белого цвета, а с плазмой или инактивированной сывороткой от здоровых лиц наблюдается отрицательная реакция в виде опалесценции. При постановке РМП с контрольными инактивированными сыворотками больных сифилисом анти­ген должен давать положительную реакцию. Антиген должен давать отрицательную реакцию с сыворот­ками здоровых лиц. Реакцию ставят в планшете для иммунологических реакций.

Результаты РМП оцениваются визуально при достаточном освещении, по объему выпавшего осадка, величине хлопьев, и обозначаются в крестах или «плюсах» (от отрицательной «–» до «++++»). Результаты реакции учитывают, если в контроле отсутствует спонтанная преципитация.

Реакция ставится в качественном и количественном вариантах. Качественная оценка реакции производится по объему выпавшего осадка, величине хлопьев и так же обозначается в «плюсах». Для получения результата необходимо всего 10-40 минут. РМП можно проводить и в количественном варианте: высоким считается разведение ≥ 1:16. РМП в количественной постановке применяется при обследовании больных сифилисом в процессе и после окончания лечения.

РМП несколько превосходит RW по чувствительности, но уступает по специфичности. За рубежом применяются аналоги РМП – RPR и VDRL.

Экспресс — метод (микрореакция на стекле): разновидность РМП, которую ставят с капиллярной кровью из пальца —«экспресс-метод».

Эта реакция также относится к липидным реакциям. Ставится со специальным кардиолипиновым антигеном и основана на реакции преципитации. Результаты оцениваются качественно как 4+, 3+, 2+ и отрицательные. Преимуществом экспресс-метода являются быстрота получения ответа (через 30 — 40 мин), небольшой объем необходимой для анализа крови (2 — 3 капли плазмы или сыворотки). Ложноположительные результаты при экспресс-методе получают чаще, чем при РВ, поэтому он разрешен для применения только как отборочная реакция при массовых обследованиях населения на сифилис и при обследовании больных в клинико-диагностических лабораториях соматических больниц. Окончательный диагноз сифилиса этим методом устанавливать запрещено. Экспресс-метод нельзя применять у беременных, доноров, а такж е для контроля после лечения больных сифилисом.

Простота схемы выполнения и низкая стоимость позволяют использовать тест РМП как отборочный, при установлении предварительного диагноза сифилиса.

Положительный результат РМП регистрируется при клинической манифестации сифилиса, через 2–4 недели после образования первичной сифиломы (твердого шанкра), и обычно указывает на повреждение тканей. Применявшееся ранее деление первичного сифилиса на «серонегативный» и «серопозитивный» определялось именно по результату РМП и реакции Вассермана.

Период времени между инфицированием и появлением положительных результатов серологических тестов называют «серологическим окном». Вследствие этого, ограничено применение РМП на ранних стадиях сифилиса (период инкубации, начало первичного периода), так как данная реакция становится позитивной лишь спустя 2 недели после появления твердого шанкра,

Во вторичном периоде РМП положительна у 98–100 % больных, а при поздних формах сифилиса (третичный сифилис, поздний скрытый сифилис) – лишь у 60–70 %.

Содержание антител-преципитинов в крови после адекватного специфического лечения сифилиса постепенно понижается, что находит отражение сначала в снижении титров, а затем и степени позитивности РМП, которая из резко положительной становится слабоположительной, а затем и отрицательной. В связи с этим РМП используют для оценки эффективности лечения и как один из критериев установления излеченности или при дифференциальной диагностике реинфекции.

1) дешевизна, простота и быстрота постановки (основной скрининговый метод);

2) РМП с определением титра используют для контроля излеченности сифилиса.

Методика исследования с применением РМП проста в исполнении, недорога, не требует специального оборудования и не занимает длительного времени; при этом реакция демонстрирует приемлемую для скрининга чувствительность и специфичность.

1) малая чувствительность при поздних формах сифилиса;

2) недостаточная специфичность.

Нетрепонемные тесты, и в т. ч. РМП, имеют невысокую чувствительность (до 70–77% при ранних формах сифилиса и до 30% при поздних формах) и часто дают ложноположительные результаты (более 3%). Нетрепонемные тесты могут быть отрицательными в 70% случаев при латентном и третичном сифилисе.

Поздние стадии (поздний скрытый и третичный сифилис), так как лабильные преципитины первыми элиминируются из организма при длительном течении сифилитической инфекции.

Большинство исследователей отмечают специфичность РМП на уровне 98%. Чувствительность РМП меньше, чем у других стандартных, более современных нетрепонемных тестов, например у RPR. Чувствительность РМП колеблется в зависимости от стадии заболевания: при первичном сифилисе — 81%, при вторичном — 91%, при скрытых формах — 94%.

По данным ГУ «ЦНИКВИ Росздрава» (Приказ № 87 М3 РФ) чувствительность РМП при диагностике всех форм сифилиса составила 95,8%.

Ложноположительные результаты, наблюдаемые при скрининге сифилиса с использованием РМП, обусловлены:

~ наличием в крови антител к ревматоидному фактору; перекрестно реагирующими антителами у больных с аутоиммунной патологией, антифосфолипидным синдромом, пожилых людей, беременных женщин, больных боррелиозом и лептоспирозами, пациентов с обширной соматической патологией; нарушениями обмена липидов; иммунодефицитами различной этиологии.

~ техническими погрешностями при постановке реакций;

РМП не является строго специфической реакцией на сифилис. Реагиновые антитела (неспецифические иммуноглобулины класса IgG и IgM) у больного сифилисом являются комплексным ответом на высвобождение липоидных молекулярных фрагментов из поврежденных клеток хозяина, с одной стороны, и на появление липопротеиноподобных структур, сходных с кардиолипином, входящих в состав бактериальной клетки бледной трепонемы, с другой стороны.

Антитела, выявляемые с помощью РМП в сыворотке крови людей, нередко могут быть обнаружены при системных поражениях паренхиматозных органов (печени, почек, легких), при инфаркте миокарда, сотрясении мозга, атеросклерозе, коллагенозах, при онкологических заболеваниях, ряде инфекций (туберкулез, сыпной тиф, малярия, лепра), при ревматизме, некоторых патологических и физиологических состояниях (тиреотоксикоз, беременность, менструация).

Положительные результаты в РМП наблюдают после злоупотребления алкоголем, приема жирной пищи, некоторых лекарственных препаратов. Количество ложноположительных результатов увеличивается при исследовании образцов крови пожилых людей.

Ложноположительные результаты РМП могут отмечаться при острых (малярия, лептоспироз и др.) и хронических (туберкулез, лепра, вирусный гепатит, боррелиоз и др.) инфекциях, инфаркте миокарда, циррозе печени, коллагенозах (особенно при системной красной волчанке), онкопатологии, вакцинации, употреблении наркотиков, злоупотреблении алкоголем и жирной пищей. Ложноположительными могут быть результаты РМП во время беременности, после родов, а у некоторых женщин и во время менструации.

Наряду с ложноположительными результатами возможны и ложноотрицательные результаты нетрепонемных тестов в серонегативной фазе первичного сифилиса:

    при избытке антител (феномен прозоны) либо при выраженной иммунной недостаточности; у больных вторичным сифилисом с симптомами злокачественности; при приеме иммунодепрессантов, в некоторых случаях ложноотрицательные результаты связаны с присутствием ВИЧ-инфекции

Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном является относительно несложным исследованием; тем не менее при ее выполнении необходимо соблюдать все рекомендации производителей диагностикума и правила работы в клинико-диагностической лаборатории.

На достоверность результата исследования непосредственное влияние оказывают технические погрешности при постановке РМП:

    при взятии крови из пальца образуются пузырьки воздуха в капилляре, что приводит к ошибке объема пробы; отсутствие контроля качества исследования – исключение из протокола исследования постановки контрольной сыворотки; использование двухвалентного цитрата натрия вместо трехвалентного цитрата натрия при взятии образца крови; нарушение процедуры перемешивания приготовленной суспензии до равномерного распределения антигена; нарушение правил использования посуды, пипеток, учитывая невозможность повторного использования одноразовой посуды; несоблюдение протокола исследования.

Источником ошибок при постановке РМП могут являться и следующие моменты:

    исследование в реакции гиперлипидемичной, гемолизированной сыворотки крови или образцов с признаками бактериального пророста; нарушение технологии взятия крови из пальца с целью получения плазмы крови (наличие пузырей воздуха в капилляре пипеток); исключение из постановки реакции контрольных сывороток крови, в частности, слабоположительных; неравномерная концентрация антигена в эмульсии вследствие недостаточного перемешивания ее перед использованием; бактериальное загрязнение эмульсии; нарушение сроков и условий хранения плазмы и сыворотки крови, антигена и его эмульсии, растворов; замена трехзамещенного цитрата натрия двухзамещенным; использование при постановке реакций загрязненных пробирок, пипеток, пластинок, растворов; недостаточная тщательность выполнения последовательных двукратных разведений; нарушение методики постановки РМП, выражающееся в отказе от добавления физиологического раствора в реакционную среду перед учетом результатов реакции.

Все вышеперечисленное обусловлено отсутствием стандартизации метода при его выполнении в ручном режиме. Вышеуказанные ошибки могут приводить к появлению и регистрации как ложноотрицательных, так и ложноположительных результатов реакции.

В связи с вышесказанным, РМП нельзя использовать в качестве единственного метода при исследовании на сифилис беременных женщин; пациентов кардиологических, неврологических, психоневрологических и офтальмологических стационаров; доноров крови и тканей; ВИЧ-инфицированных лиц.

Поэтому проведение скринингового обследования населения с использованием нетрепонемного теста на определение титра антител методом РМП является недостаточным и требует обязательного параллельного использования трепонемного теста – определения антител методами реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) или иммуноферментного анализа (ИФА).

В общем случае, для определения специфического характера положительных результатов исследования крови в РМП служат подтверждающие реакции, основанные на использовании антигенов бледной трепонемы (ИФА, РПГА, РИФ, РИТ)

Быстрый плазмареагиновый тест RPR — это быстрый тест для качественного и количественного определения реагиновых антител в сыворотке или плазме крови. Его относят к макроскопическим нетрепонемным флоккуляционным тестам по выявлению антител, ассоциированных с сифилисом.

1. История метода

Эта реакция была разработана J. Portnoy и соавторами (1957) для массового и быстрого скрининга населения с использованием образцов сыворотки или плазмы. Реакция проводится на пластиковых планшетах с впечатанными кружочками.

2. Принцип метода

При добавлении к плазме или сыворотке крови больного сифилисом суспензии стабилизированного кардиолипинового антигена в смеси с мелкодисперсными частицами древесного угля происходит образование комплексов антиген-антитело, собирающих частицы древесного угля в более крупные агрегаты; при этом результат реакции становится возможным учитывать невооруженным глазом.

Авторы метода в 1961 году предложили модификацию RPR на специальных картонных карточках с выдавленными круглыми плоскими неглубокими лунками диаметром 18 мм.

Капля исследуемого образца (неразведенная плазма или сыворотка крови) смешивается в лунке с каплей стабилизированного стандартного кардиолипинового антигена, в который добавлены частицы мелкодисперсного угля (RPR-антиген). Затем в течение 8 мин планшету вращают на орбитальном ротаторе со скоростью 100 об./мин, чем достигается стандартизация условий равномерного перемещения нанесенных реагентов. В состав набора входят положительный и отрицательный контроли. Учет результатов проводится при хорошем освещении, когда еще не высохла поверхность кружка. При образовании комплексов антиген-антитело мелкодисперсные частицы угля попадают в образовавшуюся сеть и коагулируют.

Для определения специфического характера позитивных результатов исследования крови в RPR проводят дополнительные исследования в подтверждающих реакциях, основанных на применении антигенов бледной трепонемы (ИФА, РПГА, РИФ, РИТ).

4. Учет результатов

«положительный» — при обнаружении средних и больших агрегатов,

«слабоположительный» — выявляются редкие небольшие агрегаты,

«отрицательный» — ровная серая поверхность без видимых агрегатов.

При положительных результатах рекомендуется исследовать RPR-тест в полуколичественной постановке (разведения от 1:2 до 1:1024).

5. При каких периодах заболевания лучше использовать

Реакция становится положительной спустя 2—4 недели после появления твердого шанкра.

Ограничениями применения метода RPR являются ранние стадии сифилиса (период инкубации, начало первичного периода), так как данная реакция становится позитивной лишь спустя 2—4 недели после появления твердого шанкра, и поздние стадии (поздний скрытый и третичный сифилис), так как лабильные преципитины первыми элиминируются из организма при длительном течении сифилитической инфекции.

6. Чувствительность и специфичность

Специфичность RPR-теста составляет 98%, а чувствительность зависит от стадии заболевания: при первичном сифилисе — 86%, при вторичном — 100%, при скрытых формах — 98%, при позднем сифилисе — 73% (Кунгуров Н. В. и соавт., 2002).

7. Область применения метода

Применение указанной реакции при серодиагностике сифилиса регламентировано Приказом Минздрава РФ №87 от 26 марта 2001 года «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса» (приложением №1 «Постановка отборочных и диагностических тестов на сифилис»).

Содержание антител-преципитинов в крови после адекватного специфического лечения сифилиса постепенно понижается, что находит отражение сначала в снижении титров, а затем и степени позитивности RPR, которая из резко положительной становится слабоположительной, а затем — отрицательной. В связи с этим RPR используют для оценки эффективности лечения и как один из критериев установления излеченности или при дифференциальной диагностике реинфекции.

8. Источники и причины ошибок при постановке, ложноположительные и ложноотрицательные результаты

Ложноотрицательные результаты. Точно так же, как и в тесте VDRL, при постановке RPR «феномен прозоны» может наблюдаться при постановке с выоскореактивными образцами сывороток. Этот эффект иногда возникает при анализе сывороток, взятых у больных вторичным сифилисом. Поэтому при постановке рекомендуется титрование до тех пор, пока результат не станет однозначным, особенно в случае позитивности трепонемного теста для этого же пациента.

Ложноположительные результаты (ЛПР) могут быть острыми и хроническими, в зависимости от того, насколько долго они сохраняются: острые — менее 6 месяцев, хронические — 6 месяцев и более.

Причины острых ЛПР: гепатит, мононуклеоз вызыванный вирусом Эпштейн-Барра, вирусная пневмония, малярия, прививки, беременность, сердечно-сосудистые заболевания, технические ошибки при постановке реакции.

Причины хронических ЛПР: болезни соединительной ткани, болезни иммунной системы, наркомания, лепра, туберкулез, онкопатология, ВИЧ-инфекция, сердечно-сосудистые заболевания, многочисленные переливания крови.

Технические причины ошибочных результатов теста RPR

Реакция быстрого определения реагинов плазмы крови с кардиолипиновым антигеном является относительно несложным исследованием; тем не менее при ее выполнении необходимо соблюдать все рекомендации производителей диагностикума и правила работы в клинико-диагностической лаборатории.

Источником ошибок при постановке RPR могут являться следующие моменты:

• исследование в реакции гиперлипидемичной, гемолизированной сыворотки крови или образцов с признаками бактериального пророста;

• исключение из постановки реакции контрольных сывороток крови, в частности, слабо-положительных;

• неравномерная концентрация антигена в диагностикуме вследствие недостаточного его перемешивания перед использованием;

• нарушение сроков учета результатов реакции, подсыхание реакционной среды на пластинах с формированием псевдофлоккулятов в краевой зоне;

• нарушение сроков и условий хранения антигена и физиологического раствора; использование диагностикума с истекшим сроком годности;

• несоблюдение параметров работы орбитального шейкера (скорости и времени вращения);

• использование при постановке реакций загрязненных пробирок, пипеток, наконечников пипеточных дозаторов, реакционных пластинок, растворов;

• недостаточная тщательность выполнения последовательных двукратных разведений.

Вышеуказанные ошибки могут приводить к появлению как ложноотрицательных, так и ложноположительных результатов реакции.

9. Особенности, преимущества и недостатки

Методика исследования в RPR проста в исполнении, недорога, не требует специального оборудования и не занимает длительного времени; при этом реакция демонстрирует высокую чувствительность и специфичность. Большинство исследователей отмечают самую высокую чувствительность RPR среди нетрепонемных тестов при всех стадиях сифилиса.

Важным условием является то, что все производимые в мире RPR-наборы являются стандартизированными, что делает их результаты сопоставимыми. Вместе с тем положительные результаты RPR-теста не могут безоговорочно трактоваться как наличие сифилитической инфекции в организме исследуемого пациента без подтверждения трепонемными тестами. RPR-тест непригоден для исследования спинномозговой жидкости.

RPR-тест не является строго специфической реакцией на сифилис. В сыворотке крови людей реагиновые антитела нередко обнаруживают при системных поражениях паренхиматозных органов (печени, почек, легких), при инфаркте миокарда, пневмонии, сотрясении мозга, атеросклерозе, при коллагенозах, онкологических заболеваниях, ряде инфекций (туберкулезе, сыпном тифе, малярии, лепре), при ревматизме, некоторых патологических и физиологических состояниях (тиреотоксикозе, беременности, менструации). Положительные результаты RPR наблюдают после злоупотребления алкоголем, приема жирной пищи, на фоне медикаментозной терапии. Количество ложноположительных результатов увеличивается при исследовании образцов крови пожилых людей.

Одним из лучших стандартных методов, в которых используются липоидные антигены, является рекомендуемая ВОЗ реакция VDRL. Название этой реакции обусловлено заглавными буквами учреждения, где она была разработана — Venereal Diseases Research Laboratory в Атланте, штате Джорджия, США

1. История метода

Первая успешная попытка стандартизации и создания метода для массового скрининга — микрофлокулляционного теста VDRL – была проведена A. Harris, A. Rosenberg, L. Riedel в 1946 году.

2. Принцип метода

3. Постановка теста

Микрофлокуляционный тест VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) ставится с инактивированной сывороткой крови (или спинномозговой жидкостью) на стеклянных пластинках с лунками. Исследуемая инактивированная сыворотка и свежеприготовленный антиген смешиваются в стеклянной лунке механическим вращением. Если в сыворотке присутствуют антитела к кардиолипиновому антигену, образуются агрегаты в виде коротких стержневидных структур. Образующийся комплекс «кардиолипиновый антиген-антитело» выявляется под микроскопом (одинаковые объектив и окуляр ×10).

Используется количественная модификация VDRL до разведения сыворотки 1:64.

Антиген для реакции VDRL включает 0,03 % кардиолипина, 0,9 % холестерина и 0,21 % лецитина. Его добавляют к инактивированной сыворотке больного, помещаемой на предметное стекло, которое затем вращают в течение 4 — 5 мин при комнатной температуре и сразу регистрируют результат: наличие в сыворотке реагинов вызывает макроскопически видимую флокуляцию.

Количественную оценку циркулирующих антител получают путем разведения сыворотки перед постановкой реакции в геометрической прогрессии: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16.

4. Учет результатов

Результаты могут быть выражены качественно или полуколичественно

Результаты оценивают как «реактивные» — при выявлении крупных агрегатов, «слабореактивные» — при незначительной флокуляции, «нереактивные» — при ее отсутствии.

Количественная постановка реакции с серией двукратных разведений сыворотки физиологическим раствором позволяет получить данные об истинной реактивности сыворотки, а также определить титр (наивысшее разведение, дающее реактивность), значение которого служит базовой величиной реактивности. Изменения титра в процессе и после лечения, вплоть до серонегативации, используются в качестве критерия эффективности терапии.

5. На каких стадиях заболевания лучше использовать этот тест

Реактоспособность сыворотки в реакции VDRL выявляется примерно через 4 недели после заражения сифилисом.

Титры VDRL увеличиваются у пациентов с острой инфекцией, реинфекцией или реактивацией перенесенной инфекции, которая не лечилась должным образом. Примерно у 72-84% больных с первичным или вторичным сифилисом наблюдается снижение в 4 раза титра VDRL через 6 месяцев после начала правильного лечения.

6. Чувствительность и специфичность

Специфичность VDRL в среднем составляет 98 %, чувствительность зависит от стадии сифилиса и составляет при первичном сифилисе 78 %, при вторичном – 100 %, при скрытом – 95 %, при позднем сифилисе – 71 % (S. Larsen с соавт., 1995).

7. Область применения метода

Количественная модификация постановки реакции VDRL позволяет проводить оценку эффективности лечения (после лечения идет снижение титров антител вплоть до серонегативации).

Для детей, инфицированных и проле ченных, антитрепонемные антитела сохраняются долго, и только значительное снижение VDRL позволяет проследить эффективность лечения.

VDRL является единственным тестом, рекомендуемым для исследования спинномозговой жидкости.

8. Источники и причины ошибок при постановке, ложноположительные и ложноотрицательные результаты

Ложноположительные результаты (биологическая неспецифическая реактивность) могут обусловливаться аутоантителами при заболеваниях с нарушениями иммунитета (красная волчанка, ревматизм, болезнь Шегрена, дисгаммаглобулинемия), а также при заболеваниях, связанных с усиленным разрушением клеточных ядер (малярия, пситтакоз, вирусная пневмония, карцинома).

При качественной постановке VDRL у 1–2 % больных вторичным сифилисом возможен ложноотрицательный результат (феномен прозоны).

9. Особенности, преимущества и недостатки

Главными достоинствами реакции VDRL являются низкая стоимость, легкость постановки, быстрое получение результатов с довольно высокой чувствительностью и специфичное, хотя и меньшей, чем в реакции с трепонемным антигеном.

10. Модификации метода

Процедура, уровни и результаты анализа на антитела к кардиолипину

Кардиолипин – это субстанция, находящаяся в организме человека, страдающего от заболеваний, таких как сифилис, васкулит с мраморной кожей, системная красная волчанка, антифосфолипидный синдром и самопроизвольный аборт. Антитела к кардиолипину – это форма антител, направленных против митохондрии.

Почему проводится анализ?

Анализ на антитела к кардиолипину проводится для обнаружения тромбозных эпизодов, которые не могут быть объяснены. Данный анализ может быть также назначен, если у женщины случаются повторяющиеся выкидыши. Во многих случаях анализ проводится наряду с ЧТВ и тестом на волчаночный антикоагулянт для диагностики точных причин тромбоцитопения. Данные тесты проводятся вместе, если клинические исследования установили возможность аутоиммунного расстройства.

Интерпретация результатов теста

Иногда результаты теста могут быть недостаточными, и подозрение на аутоиммунное расстройство останется, поэтому проводится анализ на антитела к иммуноглобулину A и кардиолипину. Если во время теста обнаружится присутствие антител к кардиолипину, врач может порекомендовать пройти тест снова через 6 недель. Это нужно для того, чтобы проверить, наличие антител, временное или постоянное.

Если известно, что пациент имеет аутоиммунное расстройство, но тесты показывают отрицательный результат, анализы повторяют, пока не будет отмечено наличие антител.

Если результат теста отрицательный, это обычно означает, что класс тестируемых антител отсутствует в сыворотке крови. Существуют различные классы, такие как иммуноглобулин G, иммуноглобулин M и иммуноглобулин A. Все эти классы исследуются по-разному. Иногда антитела кардиолипина могут также появиться из-за инфекции или как побочный эффект от приема медикамента. Так как это наиболее распространенные антифосфолипидные антитела, они также могут появляться автоматически с возрастом. Если концентрация этих антител слишком низка, присутствие может считаться незначительным. Однако эти антитела должны быть исследованы, чтобы проверить причину имеющихся у пациентов симптомов. Эти тесты, таким образом, связаны с симптомами пациента.

Уровни кардиолипина

Если уровень антител на кардиолипин умеренный или высокий в тесте, проводимом через 6 недель, и антитела продолжают находиться в организме, это является индикатором продолжительного заболевания. В редких случаях исследование на кардиолипин может быть рекомендовано для проверки причин сифилиса. Этот тест всегда назначается для подтверждения положительных тестов лаборатории по исследованию венерических болезней и ЭДС. Иногда если используемые в тесте реагенты не очень хорошего качества, анализ может показать ложноположительный результат. Поэтому многие доктора рекомендуют повторить исследование через 6 недель.

Для детей, инфицированных и проле ченных, антитрепонемные антитела сохраняются долго, и только значительное снижение VDRL позволяет проследить эффективность лечения.

Www. medhelp-home. ru

15.10.2018 10:49:04

2018-10-15 10:49:04

Источники:

Http://www. medhelp-home. ru/raznoe/kardiolipinovaya-proba-chto-eto-za-analiz. html

Кровь на RW (реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном, антитела IgG и IgM к Treponema pallidum) — Медицинская Компания Наука » /> » /> .keyword { color: red; } Анализ крови реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном

Кровь на RW (реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном, антитела IgG и IgM к Treponema pallidum)

Описание исследования

Сифилис – хроническое инфекционное заболевание, поражающее многие органы и системы организма. Возбудителем инфекции является бледная трепонема. Окружающая среда для нее губительна, однако биологические жидкости и влажные среды – те убежища, которые позволяют бактерии чувствовать себя комфортно и безопасно. К таковым относится сперма, секрет влагалища, слизь, гной и т. п. Инфицирование сифилисом может происходить следующим образом:

    при половом акте; парентерально (при инъекциях и ингаляциях); при бытовом контакте; при заражении плода инфицированной матерью (трансплацентарным путем).

Если организм поражен другими инфекциями, передающимися при половых контактах (например, герпесом, хламидозом, папиломовирусной инфекцией) или если при анальных контактах повреждена слизистая оболочка, это служит дополнительным фактором риска инфицирования сифилисом. У бледной трепонемы существует несколько антигенов, на которые организм вырабатывает антитела. Один из них имеет сходство с кардиолипином, применение которого позволяет обнаружить наличие антител к бледной трепонеме.

Любая фаза сифилиса является заразной, однако более всех отличаются в этом отношении первичная и вторичная стадии, если они сопровождаются наличием образований на коже и слизистых оболочках. Для попадания внутрь бледной трепонеме достаточно микроповреждений в коже или слизистой, откуда она стремится добраться в лимфатические сосуды, а затем и в лимфоузлы. После этого происходит распространение возбудителя по всему организму. Бледную трепонему может содержать слюна, грудное молоко, сперма и другие биологические среды инфицированного человека.

Продолжительность разных периодов сифилиса при классическом протекании заболевания следующая:

    период инкубации – 21-28 дней; первичная стадия, характеризующаяся отсутствием антител – 30 дней; первичная стадия, в течение которой появляются характерные для инфекции антитела – 30 дней; вторичная стадия – от 2 до 4 лет; третичная стадия – от 4 лет.

Первичная стадия характерна:

    образованием твердого шанкра (или первичной сифиломы – безболезненного образования в виде язвы или эрозии, имеющего плотное дно и появляющегося на месте проникновения возбудителя сифилиса – бледной трепонемы); развитием регионального лимфангиита (воспаления лимфатических сосудов); лимфаденита (гнойного воспаления лимфатических узлов).

В конце первичной фазы происходит самопроизвольное заживление шанкра и переход лимфаденита в полиаденит (множественное воспаление лимфатических желез), длящийся до пяти месяцев.

Вторая фаза заболевания характеризуется масштабным высыпанием вторичных сифилид, которые появляются в несколько заходов, по 1,5-2 месяца каждый, а затем сами исчезают. Вторичные сифилиды полиморфны (имеют множество форм) – папулезные, пятнистые, пустулезные. Может появляться сифилитическое облысение (аллопеция), «ожерелье Венеры» (сифилитическая лейкодерма – многочисленные бесцветные пятна на шее). Второе полугодие вторичного сифилиса характеризуется исчезновением воспаления лимфатических желез.

Третичный период сопровождается образованием бугорков и гумм (третичных сифилидов). Он наступает в 40% случаев, когда болезнь не лечилась вообще или лечилась недостаточно. Периоды высыпания разделяются довольно длительными (иногда многолетними) промежутками времени, в которые инфекция никак себя не проявляет. Третичный сифилис сопровождается разрушением пораженных тканей и органов. Третичные сифилиды содержат совсем незначительное количество агентов инфекции, поэтому почти не представляют угрозы заражения. Иммунная система при этом «успокаивается», что делает возможным очередное инфицирование (возникновение ресуперинфекции).

Первые три года заболевания – это период, в который наиболее вероятно заражение плода. При беременности инфекция чревата:

    поздними выкидышами (на сроке 12-16 недель); рождением мертвого ребенка; ранним и поздним врожденным сифилисом.

Особенно опасны для плода пятый месяц беременности и процесс родов. Врожденный сифилис проявляется сразу после рождения и имеет признаки вторичного сифилиса. Поздний врожденный сифилис может проявиться в возрасте 5-17 лет и имеет признаки третичного сифилиса, характеризуемого триадой Гетчинсона:

    гетченсоновскими зубами (передние верхние резцы имеют бочкообразную форму или форму отвертки); паренхиматозным кератитом (поражением глаз); лабиринтной глухотой.

Инфицирование сифилисом, как правило, подтверждается лабораторными тестами, однако, при наличии очевидных признаков, может быть доказано даже при отрицательных результатах исследований на характерные антитела.

Наиболее важно пройти диагностику следующим группам людей:

А) женщинам, планирующим стать матерью, т. к. возможны следующие варианты течения болезни:

    латентный (бессимптомный) сифилис; обезглавленный сифилис (без образований твердых шанкров, при попадании трепонемы непосредственно в кровь в процессе переливания или в случае пореза); бытовой сифилис; сифилис, занесенный при инъекциях;

Б) беременным женщинам, т. к. своевременная диагностика и лечение в течение первых 4 месяцев беременности дадут возможность уберечь плод от заражения.

Данный тест объединяет два вида исследований:

    RW – специфический трепонемный тест, посредством которого выявляются суммарные антитела IgG и IgM к антигенам бледной трепонемы (Treponema pallidum) – инфекционного агента сифилиса; RPR – нетрепонемный тест, цель которого – выявление суммарных антител классов IgG и IgM к кардиолипину (липиду, входящему в состав мембраны митохондрий и бактерий).

Выявление суммарного количества антител классов IgG и IgM к Treponema pallidum может быть использовано двояко:

    в качестве теста, подтверждающего наличие сифилиса; в качестве первичного тестирования, отличающегося достаточно высокой эффективностью.

Появление первых признаков сифилиса или образование твердого шанкра являются предпосылкой для проведения лабораторного исследования, цель которого подтвердить факт инфицирования. Антитела обнаруживаются через три или в течение четвертой недели после образования первой сифилитической язвы. Первичная сифилома своим появлением знаменует начало первичной серопозитивной (т. е. характеризующейся продукцией антител) стадии сифилиса. Таким образом, данный специфичный метод позволяет достаточно рано диагностировать инфекцию.

Присутствие антител класса IgG может наблюдаться в организме человека достаточно долго, иногда всю оставшуюся жизнь.

Антитела классов IgG и IgM к кардиолипину являются иммунным ответом на высвобождение из повреждаемых сифилисом клеток липоидных и липопротеиноподобных элементов. Они выявляются у 70-80% обследуемых лиц с первичным сифилисом. Если болезнь находится во второй фазе или раннем «спящем» состоянии, они присутствуют практически в 100% случаев. Их исследование применяется для диагностики и контроля эффективности лечения сифилиса.

Как правило, реакция RPR бывает положительной через неделю-полторы после появления видимого знака первичного сифилиса – шанкра. Также результат теста бывает положительным через 3-5 недель после заражения. Вторая стадия сифилиса характеризуется снижением титра антител. При позднем сифилисе у 30% обследуемых по тесту RPR антитела вообще не обнаруживаются. Значительному уменьшению количества возбудителя способствует эффективная терапия (в течение года титр может снизиться в 4 и больше раз). В 90-98 % после проведение лечения результат теста – отрицательный.

Поскольку данное обследование не относится к специфическим, то не исключены ложноположительные реакции. Так как появление антилипоидных антител характерно не только для сифилиса, но и для других трепонемных инфекций, то они могут появляться как иммунный ответ на эти инфекции, особенно если таковые сопровождаются повреждением тканей (характерно для аутоиммунных заболеваний).

При получении положительного ответа на RPR-тест обязательно проводится осмотр дерматологом-венерологом, и повторно исследуется кровь.

Ложноотрицательные ответы RPR бывают крайне редко. Обычно они обусловлены эффектом «прозоны», возникающем в данном случае при наличии очень большого количества антител. («Прозона» в контексте анализа RPR – это «обратный эффект» при очень высоких титрах антител. Такое состояние может стать толчком для химических реакций, не имеющих отношения к исследованию, но меняющих оптическую плотность раствора. Итог – получение отрицательного показателя, как бы говорящего об отсутствии антител при их очень высокой концентрации фактически).

Подготовка к исследованию

Кровь на анализ сдается утром строго натощак, после 8-12 часового голодания. Накануне вечером исключить из рациона острую, жирную пищу, спиртные напитки.

    перед тестированием воздерживаться от физических и эмоциональных нагрузок; за сутки до забора крови не употреблять алкоголь, за час – не курить; по согласованию с лечащим врачом временно прекратить прием препаратов, могущих повлиять на результаты исследования; непосредственно перед забором крови желательно 10-15 минут провести в полном покое.

Забор крови не осуществляется сразу после массажа, физиопроцедур, флюорографии, кольпоскопии, гастроскопии, биопсии, рентгеновского, мануального, инструментального, ректального, ультразвукового исследования, других диагностических и/или лечебных манипуляций.

Показания к исследованию

Исследование специфических суммарных антител IgG и IgM к антигенам бледной трепонемы назначается:

    при подготовке к беременности; при постановке диагноза «врожденный сифилис»; после случайных половых связей; при подготовке к операции; при обследовании доноров; в совокупности с другими лабораторными тестами для подтверждения сифилиса.

Исследование специфических суммарных антител IgG и IgM к кардиолипину проводится:

    при первичном обследовании, если есть подозрение на сифилис (положительный ответ подтверждается одним из специфических трепонемных тестов); при диагностике скрытого сифилиса (результат должен быть подтвержден двумя трепонемными тестами); при обследовании доноров (с обязательным проведением трепонемного теста); при общем обследовании.

Интерпретация исследования

Тест является качественным.

Результат исследования суммарных антител классов IgG и IgM к бледной трепонеме описывается коэффициентом позитивности (КП):

КП = оптическая плотность конкретной пробы/пороговое значение

Универсальность коэффициента позитивности позволяет применять его при проведении всех иммуноферментных исследований. Данная величина отражает, насколько позитивен конкретный показатель анализа. Он дает возможность врачам более точно истолковывать полученные результаты. Концентрация антител и коэффициент позитивности – показатели, не связанные между собой, поэтому КП нецелесообразно применять для наблюдения динамики течения заболевания или действенности проводимого лечения.

Интерпретация полученного показателя:

    отрицательный ответ – сомнительный ответ – 0,90-1,10; положительный ответ – > 1,10.

Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном описывается формулировками: «отрицательная», «положительная».

Нормой в обоих исследованиях является отрицательный результат.

Положительный ответ свидетельствует:

    о сифилисе в разных фазах; о «серологическом шраме» — сохраняющемся некоторое время после курса лечения положительном результате.

Отрицательный результат может быть:

    при отсутствии сифилиса; при ранней первичной инфекции.

Сомнительным считается результат, когда невозможно вполне однозначно подтвердить наличие антител, характерных для присутствия в организме агента сифилиса. Для получения точного результата через полторы-две недели кровь на анализ отбирается повторно и еще раз исследуется.

Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:

Ф. И.О.: Сидоров Иван Петрович Пол: М Дата рождения: Хх. хх. хххх

Дата забора биоматериала: Хх. хх. хххх

Исследование

Результат

Нормы интерпретации

Примечание

[506] Кровь на сифилис (реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном, антитела IgG и IgM к Treponema pallidum)

Дата выдачи (дата исследования): хх. хх. хххх

Реакция микропреципитации с кардиолипиновым антигеном

Антитела класса M и G к Treponema pallidum

Интерпретация результата осуществляется с учетом клинической картины, истории болезни пациента, а также показателей других лабораторных исследований.

Латентный бессимптомный сифилис;.

Naykalab. ru

09.11.2018 15:30:04

2018-11-09 15:30:04

Источники:

Https://naykalab. ru/analyse3.php? id=1305

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.